熒光pcr技術(shù)的基本原理和過程？離心機原理：將標(biāo)記有熒光素的Taqman探針與模板rna混合后，完成高溫退變，低溫復(fù)性，適溫延伸的熱循環(huán)，并遵守聚合酶鏈式反應(yīng)規(guī)律，與模板受體互補配對的Taqman探針

熒光pcr技術(shù)的基本原理和過程？

離心機原理：將標(biāo)記有熒光素的Taqman探針與模板rna混合后，完成高溫退變，低溫復(fù)性，適溫延伸的熱循環(huán)，并遵守聚合酶鏈式反應(yīng)規(guī)律，與模板受體互補配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離于反應(yīng)體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，被擴增的目的基因片段呈基金規(guī)律增長，通過實時進行檢測與之對應(yīng)的隨擴增而變化熒光信號強度，求得Ct值，同時利用數(shù)個已知模板濃度的標(biāo)準品作對照，即可得出待測標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)。

免疫組化步驟：

1、配反應(yīng)體系：引物、模板、buffer，dNTPs,酶，Mg2,(如果是熒光pcr，則還有樹脂或熒光探針）

2、設(shè)置熱循環(huán)參數(shù)，94、55、72等

3、上機實驗，如果是化學(xué)發(fā)光則進行實時可以觀察實驗過程。

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