利用綠色熒光蛋白（GFP）反映RNA干擾（RNAi）載體的轉染效率來研究RNA干擾載體的抑制作用RNA干擾（RNAi）是近年來生命科學領域最重要的發(fā)現(xiàn)之一。是指小的雙鏈RNA能夠特異性地降解或抑制同源

利用綠色熒光蛋白（GFP）反映RNA干擾（RNAi）載體的轉染效率來研究RNA干擾載體的抑制作用

RNA干擾（RNAi）是近年來生命科學領域最重要的發(fā)現(xiàn)之一。是指小的雙鏈RNA能夠特異性地降解或抑制同源mRNA的表達，從而抑制或關閉特定基因的表達的現(xiàn)象。只要知道某一疾病的致病基因，就可以設計針對該基因mRNA的小干擾RNA（siRNA），抑制或阻斷致病基因的表達，從而達到治療該疾病的目的。顯然，從理論上講，幾乎所有的疾病都可以用siRNA來治療，包括癌癥、傳染病、遺傳病等等。因此，RNAi受到了學術界的廣泛關注。它是目前生命科學研究最熱門的領域，也是未來新藥開發(fā)最具前景的領域。此外，RNAi技術還可以廣泛應用于農(nóng)、林、牧、漁業(yè)等領域進行育種、篩選和疾病治療。由此可見，RNAi應用廣泛，市場發(fā)展空間巨大。

然而，由于RNAi現(xiàn)象剛剛發(fā)現(xiàn)14年，國內(nèi)外尚無有效的siRNA載體，極大地限制了RNAi的應用，包括實驗研究和藥物開發(fā)。目前市場上主流的siRNA轉染試劑是脂質體，它可以在體外將siRNA轉染到多種細胞系中，但對原代細胞和懸浮細胞的轉染效果不是很好。由于它是一種脂質體轉染試劑，對培養(yǎng)細胞有一定的毒性。然而，英格恩生物公司開發(fā)了一種新的方法。轉染載體的材料不是傳統(tǒng)的脂質體，而是納米聚合物。大多數(shù)細胞系的轉染效率可達90%以上。在許多原代細胞中，轉染效果也較好。另外，公司的體內(nèi)RNA轉染試劑entranster in vivo，與核酸混合后，可以注射到動物體內(nèi)完成動物體內(nèi)RNA干擾實驗，非常方便，是動物體內(nèi)RNA干擾實驗的一項新創(chuàng)新。

在RNAi實驗中,GFP干擾組的作用是什么？

RNAi是指由與靶基因同源的雙鏈RNA誘導的特異性轉錄后基因沉默。其作用機制是dsRNA被特異性核酸酶降解產(chǎn)生小干擾RNA（siRNA）。這些siRNAs與同源靶RNA互補結合，通過特異酶降解靶RNA，抑制和下調(diào)基因表達。當外源基因如RNA干擾編輯病毒基因、人工轉移基因和轉座子隨機整合到宿主細胞基因組中并被宿主細胞轉錄時，往往會產(chǎn)生一些dsrna。它已成為基因治療和基因結構與功能研究的一種快速有效的方法。學科：生物化學與分子生物學（一級學科）、核酸與基因（二級學科）。目前，RNAi的作用機制主要在線蟲、果蠅和擬南芥中闡明。由于RNA病毒入侵、轉座子轉錄、基因組反轉錄和外源基因導入，DsRNA分子可以在細胞中出現(xiàn)。當各種原因產(chǎn)生的dsRNA出現(xiàn)在細胞中時，細胞中的組蛋白特異性蛋白復合物可以識別dsRNA。在這一階段，rde-1、rde-4和dsRNA特異性內(nèi)切酶Dicer參與rde-1、4編碼蛋白的識別，引導dsRNA與Dicer結合。然后Dicer將dsRNA展開并將其切割成21-25nt的siRNA。

RNA干擾技術的機制是怎樣的？

RNA干擾（RNAi）是指外源性或內(nèi)源性雙鏈RNA（dsRNA）引起同源mRNA特異性降解進入細胞，抑制相應基因的表達，表現(xiàn)出特異性基因缺失的現(xiàn)象。

RNA作用機制主要在線蟲和果蠅等生物中闡明。病毒感染、轉座子轉錄和外源基因誘導RNAi機制。結果，當病毒被清除時，轉座子的表達被阻斷，外源基因被阻斷，同源細胞基因組中的基因表達也被阻斷。

RNA干擾作為一種古老而進化上保守的基因沉默機制，在細胞抵御病毒感染、修復遺傳損傷和調(diào)節(jié)正?；蚬δ艿确矫姘l(fā)揮著重要作用。

RNA干擾技術有哪些作用？

RNAi（RNA干擾）通過引入與靶基因mRNA部分片段互補的21bp雙鏈RNA，可有效誘導靶基因沉默。在Dicer的作用下，單鏈或雙鏈轉錄酶抑制目的基因的轉錄。