mlbmore是什么牌子？MlbmormiRNA熒光定量PCR中的內(nèi)參用什么？mirna的熒光定量pcr可以使用肌動(dòng)蛋白作為內(nèi)參。miRNA可以通過與轉(zhuǎn)錄物的相互作用來關(guān)閉或抑制基因表達(dá)。最近的研究表

mlbmore是什么牌子？

Mlbmor

miRNA熒光定量PCR中的內(nèi)參用什么？

mirna的熒光定量pcr可以使用肌動(dòng)蛋白作為內(nèi)參。miRNA可以通過與轉(zhuǎn)錄物的相互作用來關(guān)閉或抑制基因表達(dá)。最近的研究表明，它們影響大約30%的基因。MiRNA在許多組織中差異表達(dá)，這使得表達(dá)譜的分析成為研究的熱點(diǎn)。同時(shí)，miRNA的過表達(dá)和抑制也是近年來常用的研究方法。我知道并且用過的u6參照基因只有兩個(gè):RNu6-1和RNu6-2。前者就是常見的U6，后者有時(shí)也叫u6b。在我的大鼠RNA樣本中，U6的表達(dá)量有點(diǎn)過高，u6b的Cq值接近我的靶miRNA，穩(wěn)定性良好。但這些對(duì)植物樣本中參照基因的選擇沒有指導(dǎo)意義。為了測(cè)定植物中的U6，更快的方法是找到關(guān)于這一主題的文獻(xiàn)綜述。如果沒有人寫過這樣的綜述，你就得去數(shù)據(jù)庫(kù)找所有的序列，自己對(duì)比。至于參考基因的選擇，你必須確定在特定樣本中的表達(dá)水平是穩(wěn)定的，其他文獻(xiàn)報(bào)道的參考基因不一定適合你的樣本。在做一個(gè)新項(xiàng)目的時(shí)候，一般會(huì)選擇3-5個(gè)常用的參考基因，經(jīng)過PCR檢測(cè)后選擇。

rna三條帶分別代表什么？

提取的總RNA有三條由大到小的條帶。三個(gè)是主要波段。

哺乳動(dòng)物RNA包括mRNA、rRNA、tRNA和du小RNA。根據(jù)分子量和沉降系數(shù)的不同，rRNA在RNA含量上可分為28s、18s和5.8s，rRNA是幾種RNA中最多的，高達(dá)90%以上，而mRNA很少，只有1-2%，而另外兩種RNA的分子量相對(duì)較小，這就解釋了為什么從凝膠電泳的結(jié)果上只能看到三條帶。這三條帶的完整性代表了mRNA的完整性。

RNA電泳可以在變性和非變性條件下進(jìn)行。非變性電泳用的是1.0%-1.4%的凝膠，不同的RNA帶可以分離，但無法判斷其分子量。只有在完全變性的情況下，RNA的流動(dòng)性才與分子量的對(duì)數(shù)成線性關(guān)系。

因此，在測(cè)定RNA的分子量時(shí)，必須使用變性凝膠。當(dāng)需要快速檢測(cè)總RNA樣品的完整性時(shí)，常見的1%瓊脂糖凝膠就夠了。

生物體內(nèi)一般含有核糖體RNA(r RNA)、RNA(mRNA)和轉(zhuǎn)運(yùn)RNA(tRNA)，其中rRNA含量最多，從組織中提取總RNA獲得最多的是rRNA。真核生物含有5S、5.8S、18S和28S，原核生物含有5S、16S和23S。一般5S、18S、28S在植物組織中比較常見。

s代表沉淀系數(shù)。當(dāng)通過超速離心測(cè)定顆粒的沉降速度時(shí)，該速度與顆粒大小成正比。5S、18S和28S分別有120、1900和4700個(gè)核苷酸。