普通RT-PCR與實時熒光定量PCR的引物有什么區(qū)別？特殊RT-PCR是半定量的。。即要從條帶的亮度判斷量的要比多少。。熒光定量PCR是定量的。。只不過兩者反應(yīng)體系，那些要求有很小區(qū)別，引物大多數(shù)不能

普通RT-PCR與實時熒光定量PCR的引物有什么區(qū)別？

特殊RT-PCR是半定量的。。即要從條帶的亮度判斷量的要比多少。。

熒光定量PCR是定量的。。

只不過兩者反應(yīng)體系，那些要求有很小區(qū)別，引物大多數(shù)不能不能通用。除了上面說過的熒光定量PCR產(chǎn)物要壓制在60-200nt之間，退火溫度也比較高。。像是要提升60度

pcr熒光信號怎么收集？

Pcr熒光信號有熒光定量pcr儀中的。探測器接受檢測。而dna反應(yīng)中的熒光是取決于它反應(yīng)中dna的含量。Dna含量就會，則藍色熒光強度越高。

熒光定量pcr的擴增效率e多少算好？

ABI的儀器是靠近100%最好是，羅氏的是將近2最好是，這個要看具體詳細的機型。但是數(shù)值的它表示當時很可能不一樣的，只不過換算公式之后當然都是逼近100%建議。也就是每一輪擴增技術(shù)循環(huán)后，產(chǎn)物的量加倍

rox內(nèi)參是什么？

ROX內(nèi)參染料，用于驅(qū)除信號本底以及效正孔之間有一種的熒光信號，大限度的能提高了體外擴增的準確性

內(nèi)參基因是就是為了平衡完全不同模板之間的差異，而ROX在不斷地的加熱退火過程中的熒光比較穩(wěn)定，用以做為體系中的陰性較正。

ROX不參與PCR反應(yīng)，僅除掉加樣誤差和儀器孔之間誤差作用。

內(nèi)標的作用：內(nèi)標探針與標基因探針需要不同的熒光報告基團標記，實際檢測內(nèi)標有無算正常來監(jiān)測待測樣本中是否是更具PCR抑制細胞物，盡量避免PCR假陰性。

ROX的作用：應(yīng)用于精確調(diào)整加樣誤差和管間差異，便于日后儀器自動出現(xiàn)分析報告熒光與內(nèi)參比熒光ROX的比值，使定量更準

pcr檢測的背景值是什么？

我們象把熒光PCR的前15個循環(huán)信號充當熒光本底信號（baseline，基線期），即樣本的螢光背景值和陰性對照的熒光值，測序的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋。

熒光閾值是在熒光基因擴增曲線上人即設(shè)置的一個值，它可以設(shè)定在熒光信號指數(shù)基因擴增階段任何區(qū)域上，熒光域值的缺省設(shè)置是3～15個循環(huán)的綠色熒光信號的標準偏差的10倍（機器自動出現(xiàn)設(shè)置中）。我們在做熒光定量PCR實驗時，每天都區(qū)分手動設(shè)置里，手動啟動設(shè)置中的原則要為0樣本的磷光背景值和陰性對照的熒光高了值，而要最好就是你選進入到指數(shù)期的曾經(jīng)在階段，能夠的信號是熒光信號將近域值。