半定量引物設(shè)計(jì)原則 普通pcr引物設(shè)計(jì)和熒光定量pcr引物設(shè)計(jì)的區(qū)別?
普通pcr引物設(shè)計(jì)和熒光定量pcr引物設(shè)計(jì)的區(qū)別?實(shí)時(shí)定量引物設(shè)計(jì)的要求比較高,可以按照常用的引物設(shè)計(jì)方法進(jìn)行,但擴(kuò)增片段不宜過(guò)大,最好在250bp-100bp之間。同時(shí),要保證這對(duì)引物具有絕對(duì)的特異
普通pcr引物設(shè)計(jì)和熒光定量pcr引物設(shè)計(jì)的區(qū)別?
實(shí)時(shí)定量引物設(shè)計(jì)的要求比較高,可以按照常用的引物設(shè)計(jì)方法進(jìn)行,但擴(kuò)增片段不宜過(guò)大,最好在250bp-100bp之間。同時(shí),要保證這對(duì)引物具有絕對(duì)的特異性,因?yàn)槿绻a(chǎn)生非特異性擴(kuò)增,模板數(shù)量就無(wú)法準(zhǔn)確測(cè)定,所以實(shí)時(shí)定量的意義就丟失了
引物長(zhǎng)度,20bp;TM值可設(shè)定在55℃(兩道底漆的退火溫度不應(yīng)超過(guò)2℃;產(chǎn)品長(zhǎng)度,100-150bp如果沒(méi)有合適的底漆,產(chǎn)品長(zhǎng)度可設(shè)定在80-200。
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PCR中引物長(zhǎng)度的標(biāo)準(zhǔn)是什么?PCR中引物?
QPCR與普通PCR相同,需要緩沖液、dNTP、Taq酶、引物、模板、水,QPCR試劑盒是將緩沖液、dNTP、Taq酶混合在一起,也需要引物和模板。引物可以添加到綠色人口的官方帳戶(hù)和免費(fèi)熒光定量PCR引物由專(zhuān)業(yè)人士提供。