熒光定量PCR的內(nèi)參和目的基因一定要放一起嗎？理論上，不需要內(nèi)部參考。絕對定量是計算基因在基因組中的拷貝數(shù)。如果要計算基因在基因組中的拷貝數(shù)，建議使用絕對定量的單拷貝基因組合。否則，結(jié)果很難理解。如果

熒光定量PCR的內(nèi)參和目的基因一定要放一起嗎？

理論上，不需要內(nèi)部參考。絕對定量是計算基因在基因組中的拷貝數(shù)。如果要計算基因在基因組中的拷貝數(shù)，建議使用絕對定量的單拷貝基因組合。否則，結(jié)果很難理解。如果是設(shè)計定量PCR引物，可以參考網(wǎng)頁鏈接

將熒光基團加入到PCR反應(yīng)體系中，并通過熒光信號的積累實時監(jiān)控整個PCR過程。最后用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析。隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷積累，熒光信號強度也成比例增加。本實驗室用biog-pcr技術(shù)測得的擴增曲線跳躍值一般在30左右。每次循環(huán)后，采集一個熒光強度信號，通過熒光強度的變化來監(jiān)測產(chǎn)品數(shù)量的變化，從而得到熒光放大曲線。