引物怎么自己設(shè)計呢 qpcr買試劑盒還要設(shè)計引物嗎?
qpcr買試劑盒還要設(shè)計引物嗎?qpcr和普通的PCR是一樣的,需要buffer,dNTP,taq酶,引物,模板,水等 qpcr試劑盒是將buffer,dNTP,taq酶混在一起,還需要引物和模板。
qpcr買試劑盒還要設(shè)計引物嗎?
qpcr和普通的PCR是一樣的,需要buffer,dNTP,taq酶,引物,模板,水等 qpcr試劑盒是將buffer,dNTP,taq酶混在一起,還需要引物和模板。 如需設(shè)計引物,可以添加為青生物公眾號,由專業(yè)人員提供免費的熒光定量PCR引物設(shè)計服務(wù)。
為什么QPCR引物設(shè)計在跨外顯子的接頭區(qū)?
提rna的時候,有可能混入dna,做pcr的時候,引物可能會與dna結(jié)合。如果設(shè)計的引物跨2個外顯子的話,就不會結(jié)合在dna上了。因為在dna上,外顯子通常是被內(nèi)含子隔開的。但是,轉(zhuǎn)錄出的mrna中,內(nèi)含子被切掉了,外顯子就會連在一起。因此,這樣設(shè)計的引物就可以避免與dna結(jié)合,只與rna結(jié)合了。就避免了基因組擴增。當(dāng)然,避免基因組擴增還可以用dna酶處理提好的rna,破壞有可能存在的dna。這樣的話,引物設(shè)計就無所謂了。