瓊脂糖凝膠電泳步驟 western blot轉膜的時候膜上的marker很明顯。膜的背面基本上都能看見條帶?
western blot轉膜的時候膜上的marker很明顯。膜的背面基本上都能看見條帶?蛋白質標記最初是與染料共價偶聯(lián)的純化蛋白質混合物。對凝膠運行和膜傳遞有一定的參考價值。蛋白標記帶在膜上是完整的,
western blot轉膜的時候膜上的marker很明顯。膜的背面基本上都能看見條帶?
蛋白質標記最初是與染料共價偶聯(lián)的純化蛋白質混合物。對凝膠運行和膜傳遞有一定的參考價值。蛋白標記帶在膜上是完整的,說明蛋白已經轉移了,其他樣品蛋白都是一樣的,不用擔心。另外,如果你的目標蛋白質是大分子,看看你的蛋白質凝膠里有沒有標記物殘留,如果蛋白質凝膠上的300kDa帶轉移到PVDF膜上,這個標記物殘留量通常很大,根本就沒有問題。我們把它關上。解決這一問題的方法有兩種:一種是增加標記器的樣本量;另一種是更換標記器。顯影時,如果用帶CCD攝像機的儀器讀取結果,靶條讀取化學發(fā)光信號,標記器用亮場分別拍攝;如果用膠片壓片,顯影定影時,需要提前標記。希望對你有所幫助
做western blot時,蛋白轉到膜上了,但是marker看不到,為什么marker沒轉上呢?
可能的原因是半干法轉移膜時,造模劑加入量小,緩沖液加入量過多,造模劑保存不好。如果在室溫下長時間分解,也可能是電泳凝膠運行的問題。電壓越小,膠帶越分散,但制造商不清楚。